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2023-05-045347 次浏览
细胞常用培养基介绍

细胞培养基是一种必不可少的液体培养基 ,用于支持和扩展细胞在体外的生长。合成培养基种类很多 ,常用的有十多种 ,目前使用最广泛的是RPMI 1640 ,MEM ,DMEMDMEM/F12。

RPMI 1640 培养基:最初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备?嫉呐浞绞屎闲∠赴纳 ,主要针对淋巴细胞 ,后经几次改良从RPMI 1630,1634而至1640 ,其成分较为简单。现发现它适应于多种类型细胞的生长 ,包括肿瘤细胞以及很多正常组织细胞体外培养。

MEM 培养基:是最低必需培养基 ,主要是贴壁细胞的培养 ,修改配方后也可用于其他类型细胞培养 ,例如如无钙(CaMEM培养基可被用于悬浮细胞的培养 ,而Hanks平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。

DMEM 培养基:DMEM细胞培养基是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量 ,同时又分为高糖型(4500mg/L)和低糖(1000mg/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。低糖的酵母适合在7%以下的糖浓度中生存 ,而高糖的酵母适合在7%以上糖浓度中生存。DMEM-高糖型适合生长较快、附着性较差的肿瘤细胞 ,克隆细胞 ,也可用于DNA转染的转化细胞的培养;高糖型使细胞生长过快 ,不利于融合细胞的染色体稳定 ,做单抗细胞融合时 ,一般使用低糖型 ,DMEM-低糖型主要用于干细胞的培养。

DMEM/F12(11) 培养基:DMEM培养基营养成分浓度较高 ,F12培养液成分复杂 ,含有多种微量元素。DMEMF1211结合 ,称为DMEM/F12培养基 ,该培养基适用于血清含量较低条件下细胞培养 ,常用于细胞的克隆生长及干细胞培养。

Neurobasal:这是一种专为神经细胞设计的培养基 ,适用于神经元和神经胶质细胞的培养。

培养基的颜色主要是酚红来显示的 ,酚红指示颜色非常灵敏 ,p值范围为6-8 ,颜色由黄变为紫红。酚红不是必须的 ,在有些情况下甚至是多余的 ,酚红有类似固醇类激素的作用 ,如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养 ,最好不要添加。但是为了培养方便 ,能让我们直观地感觉培养液的状况 ,加入酚红后 ,如果培养液偏酸了 ,就显示偏黄色 ,偏碱性了就显示偏紫色。另外在做流式细胞的时候 ,酚红会对结果产生影响 ,因此也不要添加。

 

在细胞培养过程中 ,检查培养液颜色和透明度变化 ,颜色变黄 ,说明pH下降;变红或紫红色 ,说明pH上升 ,细胞生长停滞、死亡 ,一般生长稳定的细胞2-3天换液一次 ,生长缓慢的细胞可3-4天换液一次。一旦新鲜的培养基中添加了血清和抗生素 ,建议1周内使用完。只有充分了解培养基 ,才能养好细胞!

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